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细胞兰TM Cell Viability Assay Kit

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所在地: 浙江 杭州市
有效期至: 长期有效
最后更新: 2011-06-10 07:36
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公司基本资料信息
详细说明
产品介绍细胞兰TM Cell Viability Assay Kit是一种新型的活细胞检测试剂盒,可用于检测人,动物,细菌,真菌细胞的活性和增殖。试剂盒采用安全,无毒的蓝色染料刃天青(Resazurin)作为指示剂,刃天青作为氧分子电子传递链的受体,呈现由蓝至红的颜色变化,反映所研究的细胞或微生物对氧分子的消耗。非活性细胞因丧失新陈代谢能力,故而不能生成红色代谢产物。检测试剂几乎不干扰细胞的正常代谢,可以对同一批细胞的增生状态进行连续观察,它也不影响细胞的抗体合成与分泌等活性,有更广泛的用途。
刃天青的红色代谢产物可用分光光度计(波长570nm 或 600nm)或荧光计(激发光波长在530-560 nm之间,发射光波长为590 nm)进行测定。试剂盒操作简便、快速(一步法),安全和可靠,其最低检测灵敏度可以达到40个细胞。

Kit 规格: 
10ml:1000 assays
30ml:3000 assays
100ml:10,000 assays

保存:4°C避光保存。 

应用:
细胞兰TM Cell Viability Assay Kit试剂盒可用于96-或384-孔板检测,适用于:
1)细胞生长、细胞增殖检测
2)药物细胞毒性和细胞调亡检测
3)生长因子作用检测
4)生物反应器细胞生长监测

使用说明: 
细胞的增殖和毒性实验,一般在96孔细胞培养板中进行,也适用于384孔板。
1.  将细胞培养在96孔板上至最佳实验密度,细胞的密度取决于实验目的。
2.  按照实验需要,在接种的细胞中加入特定的药物或生长因子进行刺激,送入细胞培养箱进行培养。
3.  培养结束后, 加入10微升/孔细胞兰TM 试剂,在细胞培养箱内继续孵育1-6小时(培养时间根据不同的细胞株而定),培养液颜色逐渐由蓝色变为红色。
4. 用 分光光度计在570nm读取吸光值。也可用荧光光度法检测,激发光波长在530-560 nm之间,发射光波长为590 nm。

数据处理:
如果是细胞生长检测或是细胞毒性检测,被检测细胞活力可以根据以下公式计算:
细胞活力(%) = 100 x (F 检测 – F空白) / (F对照- F空白) 
其中,F 检测是加入被检测物质后的平均读数,F对照是未加入检测物质的平均读数,F空白是空白读数。

HT29 细胞密度,10,000细胞/孔(80 μL)。将细胞用不同浓度的saponin 抗体螯合物处理 (10 ul),培养3天,加入10μl/孔细胞兰TM 溶液。总反应体系100 ul. 继续将细胞培养4小时,读取吸光值。数据平均值± SD (n = 3).


注意事项:
细胞兰作用时间可根据细胞种类和数量作适当调整。

参考文献
1. Ahmed SA, Gogal RM Jr, Walsh JE. A new rapid and simple non-radioactive assay to monitor and determine the proliferation of lymphocytes: an alternative to [3H]thymidine incorporation assay. J Immunol Methods. 1994 Apr 15;170(2):211-24. 
2. Shahan TA, Siegel PD, Sorenson WG, Kuschner WG, Lewis DM. A sensitive new bioassay for tumor necrosis factor. J Immunol Methods. 1994 Oct 14;175(2):181-7. 
3. Nociari MM, Shalev A, Benias P, Russo C. A novel one-step, highly sensitive fluorometric assay to evaluate cell-mediated cytotoxicity. J Immunol Methods. 1998 Apr 15;213(2):157-67. 
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