EB替代染料----Gelcolour I 核酸染料

        Gelcolour系列荧光染料成份为聚次甲基类染料，该成份多用于血管造影，并常用于治疗眼部疾病。Gelcolour是一种独特的大分子化合物，其不会穿透细胞膜进入细胞，安全无毒且与EB具有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置，若与本公司生产的可见光电泳透射仪搭配使用，灵敏度至少可提高10倍以上。该系列染料可分别用于紫外光和可见光观察。
货号：SJ0020002            保存：4℃(避光)            有效期：12个月            Forlaboratory use only

1、Gelcolour I核酸染料特点 
● 无毒性：Gelcolour I 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内，艾姆斯氏试验结果也表明，该染料   
的诱变性远远小于EB。
● 灵敏度高：适用于各种大小片段的电泳染色，对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
● 稳定性高：适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶；室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定，耐光性强。
● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 
● 操作简单：与EB一样，在预制胶和电泳过程中染料不降解；而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗即可直
接用紫外凝胶透射仪观察。
● 适用范围广：可选择电泳前染色（胶染法）或电泳后染色（泡染法）；适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳；可用 
于dsDNA、ssDNA或RNA染色。 
● 与EB有相同的光谱特性，无需改变滤光片及观察装置：标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用，使用与观察EB相同
的普通紫外凝胶透射仪观察即可，在300nm紫外光附近可得到最佳激发。

2、Gelcolour使用方法简介 
2.1  胶染法（用法同EB）（推荐方法）
（1）制胶时加入Gelcolour I核酸染料（例如：每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL Gelcolour I 10,000 × 水溶液，以此比 
例类推）。
（2）按照常规方法进行电泳。
注意事项：
A、此方法染色染料用量相对较少，500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
B、由于Gelcolour I具有良好的热稳定性，可以在热的琼脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷却，摇晃、振荡或者
翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelcolourI水溶液加到琼脂糖粉沫和电泳缓冲液中，然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。Gelcolour I兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
C、如果总是看到条带弥散或分离不理想，建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在，则说明问题与染料无关，请尝试：降低琼脂糖浓度；选用更长的凝胶；延长凝胶时间以保证边缘清晰；改进上样技巧或选择泡染法染色。
D、此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶，对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
2.2  泡染法 
（1）按照常规方法进行电泳。 
（2） 用H2O将Gelcolour I 10,000× 水溶液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中， 制成3×染色液。（例如将15μL Gelcolour I 10,000×水溶液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中）。
（3）将凝胶小心地放入合适的容器中，如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×Gelcolour I染色液浸没凝胶。室温振荡染
色30min左右，最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5～10%丙烯酰胺的凝胶，染色时间通常介于30min到1h，并随丙烯酰胺含量增加而延长。

3、注意事项：
A、用泡染法染色时，染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
B、3×Gelcolour I染色液可以大量制备，在室温下避光保存直至用完。

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