莱克多巴胺属β-受体激动剂类药物,人体食入易出现毒副作用,因此许多国家都将其列为违禁药物。国家卫生部、农业部、药品监督管理局发出的公告明确禁止莱克多巴胺在食用动物中使用。 HPLC或GC-MS一直用作检测β-兴奋剂的方法,但是其前处理步骤繁琐,费用昂贵。酶联免疫检测试剂盒则可经济、快速地检测尿,肌肉,肝脏及饲料中的莱克多巴胺。本试剂盒采用直接竞争酶标免疫法定量测定尿样、肝脏、水、饲料和肌肉中的莱克多巴胺。
二、测定原理
莱克多巴胺检测试剂盒是利用免疫学直接竞争法的原理,固相载体微孔板上包被有莱克多巴胺蛋白偶联物,加入待测莱克多巴胺标准品或样品溶液及莱克多巴胺的酶标记物抗体,包被在微孔板上的莱克多巴胺蛋白偶联物和标准品或样品中的莱克多巴胺竞争性地与酶标记物抗体结合,形成抗原抗体复合物;洗涤后加入显色剂,结合的酶标记物将无色的显色剂转化为蓝色的产物;加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色;在450 nm波长进行检测,样品中的莱克多巴胺浓度与吸收光强度成反比。
三、试剂盒组成
(1)96孔酶标板: 1块 96T/8孔。
(2)标准品: 0 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.9 ppb、2.7 ppb、8.1 ppb(1mL/瓶)
(3) 酶标记物: 1瓶(7 mL)。
(4)底物缓冲液: 1瓶(7 mL)。
(5)底物液: 1瓶(7 mL)。
(6)终止液: 1瓶(7 mL)。
(7)20倍浓缩洗涤液: 1瓶(50 mL), 加蒸馏水稀释到1000 mL 。
(2)标准品: 0 ppb、0.1 ppb、0.3 ppb、0.9 ppb、2.7 ppb、8.1 ppb(1mL/瓶)
(3) 酶标记物: 1瓶(7 mL)。
(4)底物缓冲液: 1瓶(7 mL)。
(5)底物液: 1瓶(7 mL)。
(6)终止液: 1瓶(7 mL)。
(7)20倍浓缩洗涤液: 1瓶(50 mL), 加蒸馏水稀释到1000 mL 。
(8)使用说明书 1 份
(9)封板膜: 2 张
(9)封板膜: 2 张
(10)封口袋: 1 个
四、技术参数
灵敏度:0.1 ppb
半抑制浓度(IC50):≤1.0 ppb
标准曲线范围:0.1-8.1 ppb
精确度:板内变异误差小于10%,板间变异误差小于15%
准确性(回收率):尿液、组织、饲料:100±20%
五、 交叉反应活性:
Analytes Cross-reactivity
Ractopamine 100.0
Ractopamine Gluc.A 1.0
Ractopamine Gluc B 5.8
Ractopamine Gluc C 387.0
(1S,3S) –Ractopamine 1.9
(1R,3S)-Ractopamine 0.9
(1S,3R)-ractopamine 98.5
(1R,3R)-ractopamine 451.7
Dobutamine 0.1
Ritodrine 2.4
Isoxsuprine 0.1
Salmeterol 0.1
Fenoterol 0.1
Clenbuterol <0.01
Salbutamol <0.01