哺乳动物细胞表达技术服务

货号.: AZ-s003

表达体系描述:
哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子，具备蛋白折叠和翻译后修饰的功能，对翻译后的蛋白质可进行加工，因此由哺乳动物细胞表达的外源蛋白质，在生物活性方面远胜于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统，更接近于天然蛋白质。哺乳动物细胞易被重组的DNA转染，又可将表达的蛋白质产物分泌到培养基中，方便下游纯化，因此利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。
哺乳动物细胞表达系统技术服务的主要项目如下，详细信息请与技术支持联系。

服务项目
表达质粒的构建（目的基因亚克隆）
1, 将客户提供的基因DNA片段克隆到表达载体中。
2, 大提无内毒素质粒，用于转染。
3, 为客户提供正确构建的重组表达质粒5 μg；含该质粒的DH5α甘油菌1 ml；提供阳性克隆质粒酶切或PCR检测电泳图；测序报告。
小量转染及检测表达（瞬时转染）
1, 将重组质粒转入合适的哺乳动物细胞中（293T，293F，CHO）。
2, 通过SDS-PAGE和Western-blot检测目标蛋白表达情况。
3, 为客户提供目标蛋白表达结果。
小规模目标蛋白表达及纯化
1, 瞬时转染500ml哺乳动物细胞，收集目的蛋白。
2, 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化目的蛋白。
3, 通过SDS-PAGE以及Western-blot检测目的蛋白。
4, 为客户提供纯化好的目的蛋白及纯化报告。
大规模目标蛋白表达及纯化
根据客户需求，制备合格的目的蛋白及服务报告。