【百奥实操技巧】Masson三色染色法

Masson三色染色法步骤

1. 切片常规脱蜡至水；
2. 用配制好的Weigert 铁苏木素染色液染色5 min-10 min；
3. 充分水洗，如过染可盐酸酒精分化；
4. Masson蓝化液返蓝3-5 min，水洗；
5. 蒸馏水洗1 min；
6. 丽春红品红染色液染色5-10 min；
7. 在上述操作过程中按蒸馏水：弱酸溶液=2:1比例配置弱酸工作液，用弱酸工作液洗1 min；
8. 1%磷钼酸溶液洗1-2 min；
9. 用配置好的弱酸工作液洗1 min；
10. 不经水洗直接放入苯胺蓝染色液中染色1-2 min；
11. 用配置好的弱酸工作液洗1 min；
12. 95%乙醇快速脱水；
13. 无水乙醇脱水3次，每次5-10 s；
14. 二甲苯透明3次，每次1-2 min；
15. 中性树胶封固。

Masson三色染色法结果

Masson 染色后肌纤维、胞浆、肌肉呈红色，胶原纤维呈绿色或蓝色，胞核呈黑蓝色

注意事项

1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 组织固定起着非常重要的作用，使用不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3.  酸性乙醇分化时间应该依据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
4.  弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配置 0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
5. 磷钼酸分化时要在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定，一般1-2min。

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