PCR技术miRNA定量检测方案——艾美捷试剂盒

一、前提概要

作为一种内源性非编码小分子RNA, miRNA在许多生命活动中起着重要作用, 如当机体内的某些miRNA表达下调时, 就会更容易罹患癌症和其他一系列疾病。这一现象提示, 人们可通过对miRNA进行定量检测来实现对相关疾病的早期诊断。

二、miRNA定量PCR技术服务

1.加尾法原理：

特色：

①RNA加尾和引物延伸法，样本用量少（1μg）且不需分离miRNA。

②采用通用反转录引物，一次反转录产物可用于上百个miRNA检测。

③检测通量高，可同时检测数十个miRNAs。

④不同末端成熟miRNA都能被加尾和反转录，保证定量准确性。

⑤配合QIAGEN试剂盒，保证实验可靠性，示意图如下；

⑥扩增产物特异性高，通过产物热解离曲线（融解曲线）判断。

2.茎环法原理：

三、microRNA纯化试剂盒

microRNA Purification Kit【microRNA纯化试剂盒 Cat#21300】基于Norgen纯化柱与无苯酚配方，适用于动物细胞，组织，细菌，血液，植物组织。

特色：

①25分钟提取高质量和纯度的miRNA（< 200 nt）

②两柱体系：在纯化柱上消除大RNA，在第二根纯化柱上捕获microRNA

③洗脱的microRNA可用于RT-qPCR, Microarrays, Northern Blotting以及NGS等应用.

从Hela细胞中提取microRNA

qPCR检测不同品牌的提取效果

来源：https://www.amyjet.com/featured/microrna-purification-kit.shtml