siRNA表达载体构建

近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。通过构建siRNA表达载体这种方法来制备siRNA，已成为进行RNA干扰实验的常用手段之一。 

目前百恩维生物能够为您提供包括siRNA 靶序列设计、质粒构建、测序等全方位服务。

1、siRNA表达载体的选用：百恩维生物选用的siRNA 表达载体含人的U6启动子、Pol Ⅲ 终止子、氨苄抗性基因，可以建立稳定表达系。 

2、设计siRNA靶序列： 

根据目的mRNA序列，设计3条RNA干扰靶序列，靶序列一般为19 － 21nt 长。百恩维生物亦可针对客户的需求来设计，由客户选择靶位点数量。 

对于每条选定的siRNA 靶序列，设计 siRNA 正义链和反义链，以 loop(9nt) 相连，称为 shRNA（short hairpin RNA）。 

3、百恩维生物提供阴性对照和阳性对照载体。 

siRNA质粒载体构建：合成模板、双酶切siRNA空载体、连接与转化、测序鉴定、质粒制备及定量。

提供实验结果： 质粒、甘油菌、测序结果等。