原核表达（E. coli ）技术服务

百恩维生物已成功构建完整的各种蛋白表达技术平台：包括原核蛋白表达与纯化、昆虫蛋白表达与纯化、哺乳动物蛋白表达与纯化。根据客户的需求，我们提供从基因合成，质粒构建，基因表达，蛋白纯化、检测等一站式服务。为了保证蛋白纯化的质量，百恩维生物建立了严格的产品质控体系及一整套完善的客户服务流程、保密制度以确保为客户提供优质的产品及一流的服务。

我们的蛋白质团队在优化基因密码子、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取、特定蛋白纯化系统的选择、蛋白生产工艺的优化等方面，拥有极其丰富的经验。可以满足客户个性化的需求。

原核表达是将植物、动物、微生物等的目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌表达出大量目的蛋白。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下优点：易于生长和控制；易于培养，实验耗费少；可选择多种大肠杆菌菌株及与之匹配的具各种特性的质粒。原核表达系统是迄今为止最为成熟可靠的蛋白表达系统。

原核表达技术服务按步骤收费，您可以选择从以下任意一步开始提供服务或仅选择其中的单独一步，详细价格请垂询。
    如需前期分子生物学技术服务请参考相关内容。

服务特色：

1、 一站式解决方案，从基因合成到蛋白表达纯化，完成您的实验设计。

2、 技术成熟稳定/方法手段齐全。

3、 服务周期短。

1、 基因合成，

提供客户：合成的基因及测序序列。

时间： 1~2周

2、 质粒构建，（表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取）

扩增并抽提构建好的表达质粒。
将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。
至少挑选数个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。

电泳检测，菌株中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。

提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。

时间： 1~2周

3、 摇瓶培养重组细菌，诱导表达目标蛋白。
通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
百恩维会通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
提供客户：纯化好的目标蛋白及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达95%以上。时间 2~3周：

4、 大规模蛋白制备：

蛋白生产工艺的优化

提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。

时间：协商

5、 蛋白复性服务。
利用不同复性缓冲液的体系，对目标蛋白进行小量复性试验提供复性后样品供客户检测。 可根据客户要求，按照其中一种样品的复性条件制备小量的复性蛋白。 百恩维可提供具体的复性缓冲液配方及复性工艺。

其他：内毒素去除，除菌，冻干等进一步加工。
详细检测目标蛋白的质量。

提供客户：加工后的终产品及相关实验和检测报告。
时间：1~2周