基因过表达和慢病毒构建包装纯化

1、客户提供背景资料，我们共同探讨服务的可行性和技术路线。
2. 签订技术服务合同，商定服务收费、任务期限等，客户需要预付实验总费用的70%作为实验预付款。
3. 实验结束，按合同内容交付结果。

1.根据目的基因相关信息（序列，基因序列号等）获取目的基因；
2. 选择符合实验要求的载体；
3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体；
4. 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量（不含内毒素）的重组质粒；
5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞，进行病毒包装并收集上清液；
6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒；
7. 使用病毒液感染293T细胞，测定病毒滴度。

1. 提供与本实验相关的详细资料（含课题基本情况及预期达到的目的等）；

2. 提供目的基因RefSeq ID；

3. 目的基因的表达克隆及相关信息；

4. 目的基因抗体及抗体使用说明书（如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验）；

5. 目的细胞及相关说明（如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养）。

1.       目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件；

2.       目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告；

3.       病毒滴度检测报告（病毒滴度≥1 X 10⁸ TU/ml）；

4.       功能检测的相关实验报告。

注：报告未能详尽的实验相关数据，本中心在能力范围内予以补充。