基因过表达和慢病毒构建包装纯化

本来基因表达是受到各种内外信号的精确调控的，一旦这种调控机制的任何一个环节出现问题就会失控。基因的表达过程就可能进入失控状态，就有可能表现为表达过度，即该基因被过度的转录、翻译，最终基因表达产物超过正常水平。

服务流程

1、务的可行性和技术路线。

2. 签订技术服务合同，商定服务收费、任务期限等，客户需要预付实验总费用的70%作为实验预付款。

3. 实验结束，按合同内容交付结果。

实验流程

1. 根据目的基因相关信息（序列，基因序列号等）获取目的基因；

2. 选择符合实验要求的载体；

3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体；

4. 对于测序正确的重组质粒，提取和纯化高质量（不含内毒素）的重组质粒；

5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞，进行病毒包装并收集上清液；

6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒；

7. 使用病毒液感染293T细胞，测定病毒滴度。

客户需知

1. 提供与本实验相关的详细资料（含课题基本情况及预期达到的目的等）；

2. 提供目的基因RefSeq ID；

3. 目的基因的表达克隆及相关信息；

4. 目的基因抗体及抗体使用说明书（如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验）；

5. 目的细胞及相关说明（如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养）。

结果交付

1. 目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件；

2. 目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告；

3. 病毒滴度检测报告（病毒滴度 ≥1 X 108 TU/ml）；

4. 功能检测的相关实验报告。

注：报告未能详尽的实验相关数据，本中心在能力范围内予以补充。

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