MiRNA定量PCR

 MicroRNAs（miRNAs）是一类长度约20-24nt的非编码单链RNA，在细胞增殖、凋亡、器官发生、发育、造血以及肿瘤发生等若干途径中发挥重要作用。miRNA表达的定量分析是生物功能研究的基础，细胞、组织或血液中的miRNA的检测有助于发现新的早期诊断和预测疗效及患者预后的生物标志物。本公司提供优质的miRNA实时荧光定量PCR全套技术服务。

 

实验流程

1.miRNA提取。
2.利用加尾法将RNA逆转录成cDNA。
3.随机选择一个样品进行预实验，筛选引物，优化程序。
4.荧光定量PCR正式试验。
5.提交报告，原始Ct值。

服务内容

1.相对定量：以U6 或5S rRNA为内参，检测样本中相关miRNA的相对表达量。
2.绝对定量：以化学合成的miRNA成熟链为标准品，做5个或5个以上梯度点的稀释后制作标准曲线，通过标准曲线对样品进行相关miRNA绝对定量检测。

样品要求

材料种类	样品要求	起始量	保存及运输方式
血液	新鲜血液及抗凝剂处理的全血	1ml	加入Trizol-80℃贮存，干冰运输
培养细胞	离心收集的细胞	1x107
动物组织	一般材料	100mg	-80℃或者液氮贮存，干冰运输
植物	一般材料	100mg
RNA	OD260/OD280在1.9-2.1之间，完整性好	>5ug	-80℃贮存，干冰运输

终产品
相应引物（加尾法上游引物和通用引物；茎环法引物）及序列。
完整实验报告。

服务说明

客户需提供miRNA的准确名称或登录号（miRNA数据库http://www.mirbase.org/）。
服务价格

客户可以根据需求选择不同的检测的方法进行检测，如果没有提出特定的检测方法，本公司首先选择加尾法进行检查，如果检测结果不理想与客户商谈换用其他方法进行检查，检测费用按相应检测方法收取。