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浙江鸿拓生物技术有限公司

多肽合成、多肽修饰、多肽芯片、各种肽库;核酸、引物合成,原代细胞培养建系,分...

鸿拓生物&产品技术服务
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产品技术服务

多肽合成

鸿拓生物目前使用最先进的多肽合成仪,及用于纯化和鉴定高效液相色谱仪,质谱仪。为了高效,准确的处理信息,每个多肽都是单独编码。我们在每条多肽合成时,从合成设备到相关文档的运输都遵循质量控制和质量保证标准。通常情况交货时间在3周以内,长肽和大定单交货时间会相应延长,我们提供质谱图和高效液相色谱分析图检测报告。
定制范围(毫克至克级;粗品至99%纯度)

Peptidesyntheis(<70a.a),Resin-peptide,peptidelibrary,peptidearray;图片1
Modifications:

AcetylationAmidationFormationPEGylation

PhosphorylatedBiotinylatedMAPsFattyacid

Fluorogenic(FITCFAMTAMRARhoadmineBAMCMCA

AFC,Cy3,Cy5,etc);

Specialaminoacidsandtheirderivatives;

Cyclicpeptides(disulfidebridges,lactams,etc.);

Protein-Conjugation(KLH,BSA,OVAorothercarriers);


DNA克隆

在分子生物学中,克隆和亚克隆应用在载体的特定位置插入DNA片段,并转化到宿主细胞中。尽管克隆和亚克隆技术被广泛使用,但是在操作过程中非常容易出错。当需要克隆和亚克隆时,鸿拓生物将为您提供最快和最具成本效益的解决方案。我们实验室有各类载体,包括TA克隆载体,蛋白表达载体,腺病毒和腺相关病毒(AAV)载体及基因敲入、基因敲除载体,以满足您研究的需求。从引物设计到细胞筛选,鸿拓生物每一步都为您提供合理的并具有竞争力的价格。




BAC克隆(300kbmax)

BAC(BacterialArtificialChromosome,细菌人工染色体)文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体,是进行全基因组测序、构建物理图谱、染色体步查、基因筛选及基因图位克隆的基础。

鸿拓生物所建文库插入片段的平均大小在100kb以上,覆盖率按客户要求可以达到99.99%以上。可将建好的BAC文库用384孔板单克隆冻存交到客户手中,并为您提供质量检验报告、操作BAC克隆的相关信息和相关技术支持等。

构建BAC文库是一件非常复杂工作量的工作,大型BAC文库筛选更是一件庞大的工程,所以我们精心研发,建立一套目前快捷方便的文库筛选系统,我们可以免费为客户提供相关技术信息,帮您建立BAC文库筛选系统。同时可以根据客户需要提供构建好的poolsuperpool,帮助客户建立“2维”、“3维”、最多达到“5维”的快速筛选系统


体外转录

在分子生物学中,体外转录是体外翻译的一个潜在过程,体外翻译的先决条件为杂交探针、显微注射研究、RNA和蛋白质的检测及微阵列。鸿拓生物可以为您处理后续工作来取代五花八门的商业试剂盒操作说明书。鸿拓生物将在短时间内保证高品质的产量,使您可以在任何时间继续研究您的新发现。


定点突变

在生命科学领域里,突变被广泛应用。它可以用来研究不同蛋白质的结构与功能的关系,DNARNA缺陷的下游影响,基因表达调控,DNA修复、复制等。与随机突变相比,定点突变是基于详细的结构信息基础上进行的基因精确点突变。鸿拓生物拥有先进的分子生物学平台,生成所需的突变已不再是一个难题。为了便于保存,我们将为您提供经测序验证的克隆菌。

技术步骤:

1.设计点突变引物

2.准备质粒DNA模板

3.利用PCR扩增进行突变

4.利用特异性酶消化甲基化质粒从而选择突变质粒DNA

5.转化并筛选阳性克隆

6.分析序列


大规模质粒制备

如果小规模质粒制备服务不能满足您较大规模质粒数量的产生需求,请尝试我们的大规模质粒制备。由我们鸿拓生物经验丰富的工作人员开发的标准操作,我们确保提供高纯度DNA以满足您的各种需求。


实时定量PCR分析

实时定量PCR依然是mRNA的检测和定量最敏感的技术。它经常被用来量化小样本,例如从一个单细胞中提取的mRNA等。鸿拓生物根据您的需要提供实时定量PCR和基本的终点PCR

技术流程:

1.RNA的提取

2.DNaseI消化样品RNA中的DNA

3.琼脂糖凝胶电泳检测RNA

4.RNA逆转录为cDNA

5.检测cDNA与引物质量

选择特异性好,扩增效率高的引物作为实时荧光使用引物。

6.利用相对定量的方法分析目的基因表达量的情况:

常用的看家基因有β-actinGAPDH18SrRNA

7.定量PCR检测

8.分析扩增曲线和溶解曲线


溶解曲线全部为单峰表明为特异性扩增,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。


蛋白表达

在分子生物学中,确定理想的表达条件来获得足够量的蛋白质是劳力最密集的任务之一。鸿拓生物经验丰富的团队为您提供不同的表达平台,使您在期望的可靠质量中获得足够的目标蛋白量。
1.原核蛋白表达服务

2.酵母蛋白表达服务
3.哺乳动物细胞蛋白表达服务
4.蛋白纯化服务
5.蛋白折叠重复性服务
6.大规模蛋白制备服务
7.Westernblot检测服务
大肠杆菌和酵母蛋白表达系统实验流程:

1.客户提供模板(cDNA、基因组DNA、质粒、合成基因等)
2.构建表达载体
3.筛选阳性克隆
4.优化表达条件和进行可溶性分析
5.SDS-PAGE电泳检测
6.Westernblot检测


基因打靶
鸿拓生物为您提供从基因序列到阳性小鼠的全套服务,包括打靶载体的设计和构建,转基因和基因敲除、条件性敲除/敲入服务,以及胚胎干细胞(EScell)的打靶和筛选、显微注射、后代小鼠的可遗传性检测、基因型鉴定以及表型分析等.。
服务周期
1、基因打靶载体构建服务:(完成时间1-2个月)
2、转基因小鼠服务:(完成时间3-7个月)


核酸合成

目前引物合成主要采用固相亚磷酰胺三酯法进行。基于该方法的DNA合成仪有多种,由ABI/PE公司生产的高通量DNA自动合成仪得到了广泛的应用。各合成仪进行引物合成的原理基本相同,主要区别在于合成产率的高低、试剂消耗量和单个循环用时等。
1、脱保护基(Deblocking)
2
、活化(Activation)

3、连接(Coupling)

4、封闭(Capping)

5、氧化(Oxidation)

基于以上合成的原理和步骤,目前,常见的几种纯化方法如C18柱、OPCHAPPAGEHPLC。鸿拓生物主要采用ULTRAPAGEHPLC三种纯化方法,其纯化的原理及其效果分别如下,我们建议客户应根据不同的实验需求,选择合适、经济并有效的纯化方法。
1.HAP纯化方法

2.ULTRAPAGE纯化方法

3.HPLC纯化方法


原代细胞建系和培养服务
鸿拓生物提供原代细胞培养服务。将机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。原代培养细胞离体时间短,性状与体内相似,适用于研究。一般说来,幼稚状态的组织和细胞,如:动物的胚胎、幼仔的脏器等更容易进行原代培养。我公司在正式接受实验委托一月内交付原代培养细胞株。