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HUVEC人脐静脉内皮细胞培养

HUVEC培养过程(Human Umbilical Vein Endothelial Cells) 
1. 细胞名称:人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells)
2. 购买公司:Cascade Biologics (Invitrogen公司),Catalog Number: C-023-5C;
3. 试剂及培养液配制
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4. 培养过程(简略) 
      HUVEC为原代细胞,除复苏、冻存过程中与常规细胞系如293T等贴壁细胞雷同外,需主要注意的是培养液放置温度、Trypsin消化细胞过程。
1)培养液放置温度:细胞代理销售公司技术推荐在使用前30min室温 (25-27℃)中放置配制好的培养液,用脸贴培养瓶而感觉到不冷(即接近人体温)即可使用。Trypsin/EDTA solution、Trypsin Neutralizer solution可同样处置。 
2)Trypsin消化细胞过程:加入4mL Trypsin/EDTA solution/ 25cm2 flask后晃 动3次,吸弃3mL Trypsin/EDTA,室温中作用1-3mins,显微镜下观察细胞变圆、脱离培养皿即可加入3mL Trypsin Neutralizer solution进行终止作用。 
3)转移细胞至15mL离心管中,1000rpm 离心5mins,弃上清,加入新鲜的培养液转移至新的培养皿/瓶。 
4)复苏、冻存雷同其他细胞操作,细胞复苏、传代后不可多次传代,一次 复苏的细胞尽量满足连续性试验需要。
5)可参考Cascade Biologics公司的操作。
网址:www.ecbm.cn