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ChIP-Seq全面解决方案
2014-10-09 11:51  浏览:243
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染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)也称结合位点分析法,是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,通常用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究。将ChIP与第二代测序技术相结合的ChIP-Seq技术,能够高效地在全基因组范围内检测与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段。ChIP-Seq的原理是通过染色质免疫共沉淀技术(ChIP)特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,并对其进行纯化与文库构建,然后对富集得到的DNA片段进行高通量测序。研究人员通过将获得的数百万条序列标签精确定位到基因组上,从而获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段信息。
一、技术路线和方法:

二、生物信息学分析
2.1 基本数据分析
Part01:测序数据质量评估
Part02:reads比对到基因组
Part03:peak查找
Part04:peak全基因组定位
Part05:peak在基因组repeat区域上的统计分析
Part06:peak与Tss等位点距离分析
Part07:peak附近区域序列提取及motif分析
2.2 高级数据分析
Part08:peak所在基因的COG/KOG功能分类(对植物)
Part09:peak所在基因的GO功能分类
Part10:peak所在基因Pathway分析
Part11:peak所在基因互作网络构建
Part12:差异分析(对双通道)

三、二代测序平台
Illumina平台 测序平台 模式 数据量 一个lane样品数 货号
ChIP-seq Hiseq2000 1×50 3-4M reads 12 BT2000411
ChIP-seq Hiseq2000 1×50 20-30M reads 2 BT2000412
ChIP-seq GAII 1×60 8Mreads 4 BT2000413

四、完成时间
3个月,(其中生物信息分析1个月)
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