随着上游生产力的提升，下一代抗体的复杂性也在持续增长。然而，进入下游工艺（DSP）的产品量增加，可能提高纯化复杂度，却未必能同步提升最终产品产量。当前免疫治疗药物涵盖的结构比标准单克隆抗体（mAbs）更为复杂。重要的是，这些下一代形式并不总能如预期那样与Protein A结合。例如，它们可能对pH敏感，或聚集体水平高于正常。因此，熟悉的平台解决方案可能无法实现所需的特异性或质量。

纯化困境

许多现代抗体形式具有Fc区域，Protein A确实有效。但有时抗体完全不结合，或导致低收率。此外，含有相同Protein A结合位点的产品相关杂质可能发生共洗脱。结构复杂性与传统纯化方法的能力不匹配；作为瓶颈的DSP需要重新审视。这些多样化的抗体模态具有不同的理化性质，需要不同的纯化策略。例如，下一代抗体片段可能缺失或改变Protein A结合位点、对pH敏感、形成二聚体或聚集体、高分子量和低分子量物种水平升高、产品相关杂质表现出与目标分子相似的纯化行为，或过表达轻链和轻链二聚体。与其将日益多样化的分子强行通过单一平台，先进的纯化树脂可以利用每个分子的独特结构特征。

利用抗体复杂性

工艺开发科学家正越来越多地采用亚结构域特异性配体，作为一种更具靶向性的亲和方法，用于纯化缺乏或Fc区域改变、具有其他结构增强导致不适合Protein A亲和层析、或存在共洗脱产品相关杂质的模态。轻链结合亲合力也有助于在捕获步骤减少同源二聚体。总体而言，关注Fc结构域之外抗体特定区域的亚结构域特异性亲和配体具有高选择性，能够高效捕获多种抗体形式，并提升收率和纯化性能。这些层析配体可实现稳健、可放大的纯化，适用于符合cGMP的生产工作流程。

扩展亲和与精纯工具箱

随着生产需求不断演变，高性能解决方案也在发展。Thermo Scientific CaptureSelect亲和树脂有助于为广泛的抗体和重组蛋白提供高选择性捕获，而Thermo Scientific POROS层析树脂采用对流孔结构和刚性骨架，支持高流速，帮助工艺开发人员提高生产力、简化纯化流程并保持稳定性能。基于VHH配体的CaptureSelect亲和树脂被设计用于结合人抗体的特定区域，如CH1和CH3结构域、κ或λ轻链，以及Fc区域上与Protein A不同的表位。配体的小尺寸提供了对结合位点的访问，允许高度选择性的相互作用，可在一步中提高纯度和收率。值得注意的是，这些树脂设计为在比Protein A树脂更高的pH下运行，以适应敏感的下一代抗体。使用POROS树脂进行捕获后精纯，有助于提供最终分辨率，减少新型mAbs中顽固杂质，并支持抗体管线的纯度和可放大性要求。

随着滴度上升和抗体结构多样化，纯化的未来可能不再是寻找单一通用平台，而是灵活运用亲和与精纯工具箱，构建能够应对更高上游生产力和抗体复杂性所带来的下游挑战的工艺。

来源：GEN（英文原文，生物航编译，内容以原文为准）