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CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞；原代细胞|细胞系|细胞株|菌种；细胞库管理规范，提供的细胞株背景清楚，提供参考文献和最优培养条件，

CRL-11609 RWPE-1 人正常前列腺上皮细胞

Growth Properties: adherent

Organism: Homo Sapiens (human)

Propagation: Complete growth medium:K-SFM +0.05mg/ml BPE + 5ng/ml EGF

Temperature: 37.0℃

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

注：K-SFM （GIBCO  17005-042）含有BPE和EGF

Subculturing: Protocol: Remove medium, and rinse with PBS (pH7.2). Remove the solution and add 1 to 2 ml 0.05% trypsin-0.02% EDTA solution .Allow the flask to sit at 37.0℃ until the cells detach.Add fresh culture medium, aspirate and dispense into new culture flasks.
Subculturing ration: 1:3 to 1:5 is recommended.
Medium renewal: Every 2  days.
Preservation: Freeze medium: Complete growth medium + 40% NBS + 10% DMSO
Storage temperature: liquid nitrogen vapor temperature.

1.      接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.      用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.      严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.      将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.      用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.      1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.      换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。