北京正旦国际科技有限责任公司

产品编号：ZDK-007Z                                                                                                                                                                                                         规格：100T

该产品由军事医学科学院研发监制

一、原理

二、试剂

 A．碳酸盐缓冲液              100ml

B．磷酸盐缓冲液               20ml

C. 黄嘌呤                           5mg

D．鲁米诺                          5mg

E．黄嘌呤氧化酶贮存液     0.1ml

三、试剂配制

A．0.2mM黄嘌呤: 使用前用碳酸盐缓冲液配制，称取的黄嘌呤毫克数除以0.0304得到的商数为应加入的碳酸盐缓冲液毫升数。

B．0.2mM鲁米诺: 使用前用碳酸盐缓冲液配制，称取的鲁米诺毫克数除以0.0345得到的商数为应加入的碳酸盐缓冲液毫升数。

C．发光剂:黄嘌呤溶液与鲁米诺溶液体积混合液，室温可放一周。

D．黄嘌呤氧化酶使用液：取混合均匀的黄嘌呤氧化酶0.1ml于6000转/分离心8分钟，倾去上清，使沉淀溶于1.2ml磷酸盐缓冲液中，用时以同样的缓冲液稀释10倍。只要发光值无明显下降均可使用。

四、方法

1．对照加10µl黄嘌呤氧化酶与发光管中，再加入发光剂990µl起动反应，记录发光峰值，2-3次均值作为本底发光(V)。

2．以测定血液样品为例:分别取1:50溶血液2µl、4µl（依据样品情况可选取不同的量，通常要小于10µl）加入测定管中，再加入黄嘌呤氧化酶10µl，最后加入发光剂990µl混合，放入样品池中，记录发光峰值(V_L)。

五、酶活力计算

1. 酶活力单位：在25℃，测定条件下，抑制50%发光所需的酶量为一个活力单位。单位体积（每毫升）或单位蛋白质量样品中包含的酶活力单位数为酶比活。

2. 以对照管发光值(V)为100%，样品管发光值(V_L)，计算样品管中SOD对发光值的抑制率。抑制率(%)=(V- V_L)/ V。依据酶活力单位定义得出样品的SOD酶活力单位数。

五、保存

    于4℃保存半年。