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微生物基因组改造

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最后更新: 2020-03-21 09:58
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 大肠杆菌基因组编辑

一些微生物被应用于工业发酵,生产乙醇、食品及各种酶制剂等。对工业微生物开展的基因组研究,不断发现新的特殊酶基因及代谢过程和代谢产物生成相关的功能基因,可以将其应用于生产以及传统工业、工艺的改造,同时推动现代生物技术的迅速发展。

安必奇生物推出基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务和利用CRISPR/Cas9平台的微生物基因组改造服务。

基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务和利用CRISPR/Cas9平台的微生物基因组改造服务
基于Rec同源重组法的微生物基因组改造服务

细菌基因敲除的传统方法是利用自身的Rec系统对外源进入的DNA进行同源重组,从而实现目标基因的等位替换。通过设计靶基因的同源融合片段,将其克隆至自杀载体中,自杀载体通过接合输入到靶细菌。通过抗生素筛选细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株。在第二轮反向选择压力下,只有细菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒的细菌才可以存活。之后通过PCR鉴定即可获得目的基因的缺失突变株。

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