同时,我们提供医学疾病分子机制整体课题外包服务,基于细胞/动物模型,发现新致病基因和已知致病基因的突变型,从而研究疾病的遗传分子机制,推动转化医学研究和成果转化。
技术流程
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载体构建- 目的基因过表达载体的构建。
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病毒包装- 表达载体、辅助质粒共转染293FT细胞,收集病毒上清,纯化和浓缩病毒颗粒。若选择转染,则跳过此步。
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转染、转导- 电转染或转染试剂(脂质体等)进行细胞转染,或病毒转导。
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筛选- 根据表达载体的筛选基因选择药物进行筛选,如嘌呤霉素、G418等。
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扩大培养- 将筛选出的单克隆细胞进行扩大培养。
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鉴定- PCR、Q-PCR、western等从DNA、mRNA、蛋白水平进行检测。
服务步骤 | 服务周期 | 交付结果 |
目的基因合成 | 1周 | 测序报告 |
目的基因亚克隆 | 3天 | 冻干粉质粒、含重组质粒的甘油菌一管、测序报告 |
病毒包装 | 1周 | 病毒储存液(>10^8 PFU)、重组后的病毒载体质粒 |
阳性克隆筛选 | 2周 | 用于筛选的药物浓度 |
阳性克隆鉴定 | 3天 | 阳性细胞株、测序报告、Q-PCR、western检测结果 |
服务内容
我们的优势
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多样的细胞种类- 在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、 V79、CHO、HepG2 等多个种属细胞中成功构建过表达、Knockdown和Knockout细胞系。
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各种表达载体- 通过2A、IRES、多启动子、融合表达等手段,在一个质粒里实现同时表达两个或者两个以上基因。同时,还可以选择多种启动子、报告基因和亲和标签。
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服务- 我们提供从稳定细胞系构建至重组蛋白生产的服务。
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省时省钱- 在先进的实验设备和完善的技术支持下,让您在短时间内,用少量的钱获得服务。
https://www.abace-biology.com/Cell-line-customization.htm