腺病毒包装技术服务
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腺病毒包装技术服务
详细信息 一、腺病毒包装概述： 腺病毒(Adenovirus，Ad) 的基因组为线形双链DNA，长度约为36kb，被包装在一个二十面体的蛋白质外壳内，可分为编码区和非编码区，一般适用于治疗的高效控制系统。 腺病毒包装其主要原理是将目的片段克隆到腺病毒表达载体上，表达载体与腺病毒包装质粒通过重组后导入腺病毒包装细胞进行包装，包装好的病毒进一步进行扩增和滴度测定。目前较常用的系统如Ad Easy，Ad Max，以及invotrogen的穿梭系统。不同的包装系统其表达载体与包装载体发生重组的方式，场所都有所不同，如Ad Easy 系统是在细菌里发生重组的，重组的质粒线性化后转染细胞可包装成腺病毒，Ad Max系统表达载体与包装载体是在细胞中发生重组，invitrogen的穿梭系统则是体外重组。 二、与传统的转染方式相比，如脂质体转染、腺病毒感染具有以下特点： 1.可感染的细胞种类多，宿主范围广，几乎可以感染所有类型的细胞。 2.感染效率高，特别适合质粒载体转染效率低的细胞，如原代培养细胞，神经细胞等，且外源基因表达水平较高。 3.包装外源基因的片段大，高达10kb。 4.腺病毒载体构建及包装容易操作，易于制备出滴度高的大量病毒。 5.当腺病毒感染细胞后，病毒基因组存在于细胞染色体外，不整合到细胞染色体中，避免了因整合引起的基因突变及激活致癌基因，生物安全性高。 三、腺病毒包装服务内容： 1.客户提供插入片段信息；如序列、NCBI登录号等； 2.将目的片段克隆到腺病毒表达载体上； 3.腺病毒包装、扩增、滴度的测定； 4.实验报告提交。 四、客户提供： 1.客户提供腺病毒包装的实验方案； 2.若客户只提供组织、细胞等样本，还需提供目的基因NCBI登录号，本公司将额外收取RNA提取及逆转录费用； 3.对于本公司已有的载体和模版，免费提供。 五、实验报告内容： 1.含目的片段的腺病毒一份，可直接用于转染； 2.引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份； 3.腺病毒包装实验所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份。 共0条 相关评论 |
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