基因过表达和慢病毒构建包装纯化
服务流程:
1、客户提供背景资料,我们共同探讨服务的可行性和技术路线。
2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等,客户需要预付实验总费用的70%作为实验预付款。 3. 实验结束,按合同内容交付结果。 实验流程:
1.根据目的基因相关信息(序列,基因序列号等)获取目的基因;
2. 选择符合实验要求的载体; 3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体; 4. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量(不含内毒素)的重组质粒; 5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞,进行病毒包装并收集上清液; 6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒; 7. 使用病毒液感染293T细胞,测定病毒滴度。 服务周期及时间:
客户需知:
1. 提供与本实验相关的详细资料(含课题基本情况及预期达到的目的等);
2. 提供目的基因RefSeq ID;
3. 目的基因的表达克隆及相关信息;
4. 目的基因抗体及抗体使用说明书(如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验);
5. 目的细胞及相关说明(如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养)。
结果交付:
1. 目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件;
2. 目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告;
3. 病毒滴度检测报告(病毒滴度≥1 X 108 TU/ml);
4. 功能检测的相关实验报告。
注:报告未能详尽的实验相关数据,本中心在能力范围内予以补充。
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